食用菌液体菌种的发展与研究现状
菌种是食用菌生产的重要资料，相对于传统的固体菌种生产，液体菌种具有独特的优越性。其特点是生产周期短、菌龄一致、活力强、效率高，能够使食用菌摆脱传统的生产模式， 推动食用菌行业实现工业化和标准化， 被业界认为是未来食用菌生产发展的方向。
一、食用菌液体菌种的发展概况
食用菌液体菌种的生产工艺20世纪60年代在美国兴起，荷兰、英国等国家的食用菌生产企业普遍采用液体菌种进行生产，日本和韩国的菌种现在几乎都采用液体菌种。每个栽培场都自制液体菌种，这样生产中液体菌种和栽培生产两条线同时进行。液体菌种在培养罐生产后经输送管道连接至接种室的自动接种机。自动接种机设于特制接种房内，工人在接种房外即可完成操作，且液体菌种机接种成功率非常高。
我国应用液体菌种进行生产还不广泛，且大都处于实验阶段。现在对液体菌种的研究也集中于以前广泛栽培的食用菌品种，如香菇、草菇、金针菇、杏鲍菇、灰树花、鸡腿蘑等。从试验结果来看，绝大多数的食用菌菌丝都能在适宜的液体培养基中生长，生产出合格的液体菌种。
二、食用菌液体菌种生产的主要设备
与固体制种比较，液体制种技术条件较高，所需的主要设备包括：液体培养基配制设备，包括电子秤、不锈钢锅、电磁炉和增压泵（输送培养基到发酵罐中）等；摇瓶菌种培养设备，包括各种规格的锥形瓶、控温旋转式摇床等；液体菌种培养设备，包括发酵罐、空气过滤装置、温度控制装置、冷却装置、停电保护装置、空气压缩机和输送管道等；接种培养设备，包括接种针、液体菌种自动接种器、接种箱、超净工作台和生化培养箱等。目前，全国生产液体菌种设备的企业有多家，有些设备可操作性差，一般用户技术不太熟练容易造成污染。根据专家多年的液体菌种指导的实践，一套优良的液体制种设备要有良好的空气过滤系统、灵敏的温度控制系统、快速的冷却系统、停电保护装置，耐高压精加工的罐体组成。液体制种利用的发酵罐仅仅是其中的一个主体设备，与其配套的接种枪等设备同等重要，当进入生产环节袋料接种时，需严格的无菌操作环境，才能保证栽培袋不受污染。
三、食用菌液体菌种的培养基
液体菌种的培养基主要成分是碳源、氮源、矿质元素和维生素。碳源主要是蔗糖、葡萄糖等。氮源主要是蛋白胨、酵母粉等。无机盐可加入磷酸二氢钾、硫酸镁等。维生素可加入维生素B。液体培养基的液体粘度与食用菌的菌球形成关系密切。粘度小，形成的菌丝球大，数量小；粘度大，形成的菌丝球小，数量大。在生产中常加入琼脂和玉米粉增加粘度。培养基配方大致为:麸皮3%，玉米粉3%，葡萄糖2%，磷酸二氢钾0.3%，硫酸镁0.15%，维生素B110mg/ L。以下介绍八种常用食用菌的配方:a.葡萄糖2%，玉米粉2%，磷酸二氢钾0.3%，硫酸镁0.15%，蛋白胨0.2%，维生素B110mg/ L。适合大多数品种。b.玉米粉3%， 葡萄糖1%，磷酸二氢钾0.3%，硫酸镁0.15%，蛋白胨0.2%，维生素B110mg/ L。适合培养平菇。 四、食用菌液体菌种质量的检测方法
1.菌丝量测定 量取一定体积的培养液，经3000r/min离心10min，弃除上清液，称菌泥质量。这种方法的准确性依培养液营养组成而定，若培养液组成分是可溶性的，那么测定结果是准确的；若营养组分是部分溶解性的，如麸皮、黄豆粉等，则测定结果偏高。因此，还可用过滤法测菌丝体干重，根据菌丝球的大小，选用适当筛子过滤，洗涤，滤得的菌丝体应达10g/ L或菌泥在20～25g/ L。
2.菌丝体形态观察 在深层培养的早期和中期，菌丝粗壮，分枝较少，原生质体嗜碱性强，着色深，有些菌种的菌丝有横隔，有锁状联合；而后期菌丝变细，并有大量分枝产生，原生质体嗜碱性弱，色浅，出现较多空泡，此时菌丝通常不再出现横隔或锁状联合，或仅有少量存在，这是菌丝衰老的特征，应提前放罐。在深层培养过程中菌丝常常疏松紧密地集合在一起，成网状，肉眼观察即为菌球。菌球中空时表明其中菌丝已老化，部分菌丝自溶。有的菌丝在深层培养之中呈絮状。菌球表面有或无毛刺，有毛刺说明生长旺盛；毛刺消失，菌球光滑，表明开始老化。菌球颜色由浅变深，也表明老化。在正常培养中，80%菌球直径要小于2mm。培养终止时菌球浓度一般达到（1 000～1 500）个/ mL。
3.酸碱度测定 不同种类的食用菌，都有一个最适酸碱度，在适宜的酸碱度环境中，菌丝生长最快。pH值过低，对菌丝球大小、形态、活力均有影响。另外，在有异常发酵时，pH值也会有明显的变化。因此，发酵过程中要不断检测发酵液的酸碱度，并进行调整。一般的发酵罐都备有酸碱度调整孔口，通过孔口向罐内添加酸液或碱液，调节培养液的pH值。一般发酵终止时pH值在5.0左右。
4.作纯种试验 将菌球液接种到液体、斜面固体培养基上共4支，其中，1支斜面固体、1支液体，pH为7.2～7.4，置37℃下观察3d，判定结果：如液体污染杂菌，会散发出异味；固体斜面污染杂菌，可见表面生长菌落或菌苔（菌落成片称菌苔）。另1支斜面及液体pH为6.0～6.5，置温度26℃下7～9d后观察，判定结果：液体有异味即为有杂菌；斜面也可看到带色的（绿、黑、黄、红色）霉菌为污染，已污染的杂菌的培养液应废弃，如无污染，则可观察本菌生长及萌发情况，液体及固体在表面均可见发白色菌丝生长。
食用菌产业在我国农业生产结构具有重要的地位，工厂化和标准化是食用菌产业的必经之路，而液体菌种的应用和推广是食用菌产业化发展过程中的关键一环。因此我们应该在稳定发展现有常规种类的液体菌种的基础上，同时适度发展珍稀食用菌在液体菌种上的开发，提高液体菌种发酵设备的精密度，加强操作人员专业素质，完善液体菌种配套设备，促进我国食用菌产业的进一步发展。（天津市林业果树所 罗莹）
